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BOTTIN

Surproduction, purification et cristallisation de la 17Beta-HSD de type 5 et 2.

Chercheur(s) du CRCHUQ : Sheng-Xiang Lin
Autre(s) chercheur(s) : Sheng-Xiang Lin

En parallèle avec nos études sur l'enzyme du type 1, nous étudions actuellement la surproduction, la purification et la cristallisation de la 17Beta-HSD de type 5 et de type 2. L'enzyme de type 5 est purifiée en utilisant un détergent non-ionique, le Beta-OG, ce qui nous permet d'obtenir une enzyme pure avec une activité spécifique plusieurs centaines de fois supérieure à celle obtenue par les procédures antérieures. Jusqu'à maintenant, nous avons effectué la cristallisation par "sparse matrix screening", produisant des petits cristaux. Nous sommes présentement en train d'améliorer notre protocole de cristallisation afin de pouvoir obtenir des cristaux utilisables pour la diffraction des rayons-X. L'enzyme de type 2 est surproduite en utilisant le système d'expression par baculovirus et sa purification est faite en utilisant un système à base de détergent similaire à celui utilisé pour la 17Beta-HSD de type 5.

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